La matriz extracelular en la curación de las heridas cutáneas. Aspectos físicos, químicos y biológicos / Extracellular matrix in healing of cutaneous wounds. Physical, chemical and biological aspects

Se revisan los nuevos conocimientos sobre la matriz extracelular (MEC), que han permitido descubrir su importante rol en la cicatrización de las heridas cutáneas. Se describen sus características morfofisiológicas y cómo interviene en la curación de las heridas cutáneas. Se presentan cuatro casos clínicos en los que se aplicó este enfoque terapéutico: los sustitutos de piel y la "cura húmeda"

We review the new knowledge about the extracellular ma-trix (ECM) that has allowed us to discover its important role in the healing of cutaneous wounds. The morpho-physiological characteristics of ECM and its role in the healing of cutaneous wounds are described. Four clinical cases are presented where this therapeutic approach was applied: the skin substitutes and the "moist wound healing".

Comparação do mecanismo de heterorresistência em Serratia marcescens por time kill curve frente ao meropeném / Comparison of heteroresistance mechanism in Serratia marcescens by time kill curve against meropenem

Serratia marcescens pertence à Família Enterobacteriaceae, é Gram-negativa e anaeróbica facultativa, sendo bem distribuída na natureza; pode ser isolada como saprófita do solo e da água. Possui um significado clínico relevante, pois acarreta infecções nosocomiais e pulmonares em determinados setores da saúde, como unidades neonatais, maternidades e UTIs, além de sepse, meningite, choque endotóxico e infecções do trato urinário. O intuito desse estudo foi analisar o mecanismo de heterorresistência em linhagens sensíveis de Serratia marcescens diante das concentrações testadas de meropeném. As linhagens SR1 e SR2 apresentaram perfil heterorresistente, ao passo que a SR6 demonstrou ser não heterorresistente, com CIM elevado (32µg/mL). Os isolados de Serratia marcescens são suscetíveis ao meropenem, por testes de sensibilidade padrão, mas contêm subpopulações resistentes ao mesmo.

Serratia marcescens belongs to the Enterobacteriaceae family, it is optional anaerobic gram-negative, being well distributed in nature and it might be isolated as saprophytic from soil and water. It has a meaningful clinical significance, because it causes nosocomial and lung infections in certain healthcare sectors, such as neonatal units, maternity units and UTIs; septicemia, meningitis, endotoxin shock and urinary tract infections. The aim of this study was to analyze the mechanism of heteroresistance in susceptible strains of Serratia marcescens in the presence of the tested concentration of meropenem. The lineages SR1 and SR2 presented heteroresistant profile, while the SR6 showed to be nonheterorresistente, with CIM (32 µg/mL). The Isolates of Serratia marcescens are susceptible to meropenem, by standard sensitivity testing, but there are subpopulations resistant to it.

Characterization of SH-SY5Y neurons subject to 92kHz ultrasound stimulation / Caracterización de neuronas SH-SY5Y sujetas a estimulación por ultrasonido de 92 kHz

SUMMARY: Cellular microstructural changes due to ultrasound exposure are critical to understand and characterize in order to further the establishment of ultrasonics in cell and tissue engineering and medicine. In this study, neurite length, nuclear morphology, and cellular toxicity are assessed at varying intensities of 92 kHz ultrasound provided by a piezoceramic disk element and incident upon SH- SY5Y neurons in vitro. Findings suggest that stimulation increases neurite length up to 2.73 fold tested at α = 0.05 in an intensity dependent manner. Additionally, stimulation causes a statistically significant (α = 0.05) decrease in nuclear area and less elongated nuclei, by 1.78 fold and 1.38 fold respectively, also in an intensity dependent manner. For maximum transducer surface intensities ranging from 0 to 39.11 W/cm2, the toxicity of 92 kHz ultrasound is assessed and a nontoxic range is determined using Caspase-3 and Annexin V staining, in addition to Calcium imaging via Calcein-AM staining. Intensities of up to 1.6 W/cm2 are found to be nontoxic for the cells under the parameters used in this study.

RESUMEN: Los cambios micro estructurales celulares debidos a la exposición a los ultrasonidos son fundamentales para comprender y caracterizar el establecimiento de los ultrasonidos en la ingeniería y la medicina de células y tejidos. En este estudio, la longitud de las neuritas, la morfología nuclear y la toxicidad celular se evalúan a intensidades variables de ultrasonido de 92 kHz proporcionado por un elemento de disco piezocerámico e incidente sobre las neuronas SH-SY5Y in vitro. Los resultados sugieren que la estimulación aumenta la longitud de las neuritas hasta 2,73 veces probada a α = 0,05 de una manera dependiente de la intensidad. Además, la estimulación provoca una disminución estadísticamente significativa (α = 0,05) en el área nuclear y núcleos menos alargados, en 1,78 veces y 1,38 veces, respectivamente y también de una manera dependiente de la intensidad. Para intensidades máximas de la superficie del transductor que oscilan entre 0 y 39,11 W / cm2, se evaluó la toxicidad del ultrasonido de 92 kHz y se determinó un rango no tóxico mediante tinción con Caspasa-3 y Anexina V, además de imágenes de calcio mediante tinción con Calceína-AM. Se encontró que las intensidades de hasta 1.6 W / cm2 no son tóxicas para las células bajo los parámetros usados en este estudio.

Hepatic mitochondria in diet-induced obese mice (stereology and molecular analysis) / Mitocondrias hepáticas en ratones obesos inducidos por la dieta (estereología y análisis molecular)

SUMMARY: The world population is going through an obesity epidemic that has severe consequences for the health system. This study focused on studying hepatic mitochondria in obese animals induced by a high-fat (HF) diet and used the model-based stereology in electron micrographs for the quantitative study. Besides, the gene expressions of molecular markers of mitochondrial biogenesis carnitine palmitoyltransferase 1a (Cpt 1α), mitochondrial transcription factor a (Tfam), uncoupling protein 3 (Ucp 3), and nuclear respiratory factor 1 (Nrf 1) were analyzed. The HF diet caused a weight gain of +1820 % comparing the control group (C) with the HF group (from 0.32±0.31 g to 5.5±0.39 g, P<0.001). The HF group showed fat droplets in the hepatocyte cytoplasm (steatosis) and less dense and large mitochondria in transmission electron microscopy. The mitochondria size (cross-section) did not show a significant difference between the groups C and HF. However, the mitochondria numerical density per area was 30 % less, the mitochondrial surface density (outer membrane) was 20 % less, and the mitochondrial volume density was 22 % less in the HF group than the C group. The gene expressions of molecular markers of mitochondrial biogenesis Cpt 1α, Tfam, Ucp 3, and Nrf 1 decreased in the HF group compared to the C group. The quantitative results match perfectly with the molecular ones of mitochondrial biogenesis markers. In the future, it will be crucial to verify if and how these data recover with the reduction of obesity, which would be of significant interest given the current obesity epidemic that affects the world population.

RESUMEN: La población mundial atraviesa una epidemia de obesidad que tiene graves consecuencias para el sistema de salud. Este estudio se centró en el análisis de las mitocondrias hepáticas en animales obesos inducidos por una dieta alta en grasas (HF) y utilizó la estereología basada en modelos en micrografías electrónicas para el estudio cuantitativo. Además, se analizaron las expresiones génicas de los marcadores moleculares de la biogénesis mitocondrial carnitina palmitoiltransferasa 1a (Cpt 1α), factor de transcripción mitocondrial a (Tfam), proteína desacoplante 3 (Ucp 3) y factor respiratorio nuclear 1 (Nrf 1). La dieta HF provocó un aumento de peso de +1820 % comparando el grupo de control (C) con el grupo HF (de 0,32 ± 0,31 g a 5,5 ± 0,39 g, P <0,001). El grupo HF mostró gotas de grasa en el citoplasma de los hepatocitos (esteatosis) y mitocondrias menos densas y grandes en la microscopía electrónica de transmisión. El tamaño de las mitocondrias (sección transversal) no mostró una diferencia significativa entre los grupos C y HF. Sin embargo, la densidad numérica de mitocondrias por área fue 30% menor, la densidad de superficie mitocondrial (membrana externa) fue 20 % menor y la densidad de volumen mitocondrial fue 22 % menor en el grupo HF que en el grupo C. Las expresiones génicas de los marcadores moleculares de la biogénesis mitocondrial Cpt 1α, Tfam, Ucp 3 y Nrf 1 disminuyeron en el grupo HF en comparación con el grupo C. Los resultados cuantitativos coinciden perfectamente con los moleculares de los marcadores de biogénesis mitocondrial. En el futuro, será crucial verificar si estos datos se recuperan y cómo se recuperan con la reducción de la obesidad, lo que sería de gran interés dada la actual epidemia de obesidad que afecta a la población mundial.

Métodos biomoleculares em caso de lesão intraepitelial cervical de alto grau / Biomolecular methods in case of high-grade cervical intraepitelial injury

Cervical cancer is the second neoplasm that most affects women in Brazil. It is a slow-progressing disease with well-defined stages. When diagnosed early, it has a high probability of cure, and it is essential to study methods that help in its diagnosis. The main factor associated with this neoplasm is infection with HPV, a virus that infects approximately 75% of sexually active people. Currently in Brazil the most used prevention method is the Pap smear test. With further studies on molecular biology and HPV, screening methods for cervical carcinoma have emerged, based on the detection of HPV DNA. Among these new methods is the double staining p16 / Ki-67, a technique developed aiming at a high specificity for detecting high-grade lesions. This is a bibliographic review work with the objective of discussing how biomolecular methods can be important tools for the early diagnosis of cervical cancer. The most used methods to diagnose HPV are cytopathological, colposcopic and histopathological exams, however these methods can present high variations in the detection of neoplastic lesions. With this study, we concluded the importance of using double staining p16 / Ki-67 for an accurate diagnosis in cases of cervical cancer.

O câncer de colo de útero (CCU) é a segunda neoplasia que mais acomete mulheres no Brasil. É uma doença de progressão lenta com estágios bem definidos. Quando diagnosticado precocemente tem grande probabilidade de cura, sendo indispensável o estudo sobre métodos que auxiliem no seu diagnóstico. O principal fator associado a essa neoplasia é a infecção pelo HPV, vírus que infecta aproximadamente 75% das pessoas sexualmente ativas. Atualmente, no Brasil, o método de prevenção mais utilizado é o exame citológico de Papanicolaou. Com maiores estudos sobre biologia molecular e HPV surgiram métodos de triagem do carcinoma cervical, baseados na detecção de DNA-HPV. Entre esses novos métodos está a coloração dupla p16/Ki-67, técnica desenvolvida visando uma alta especificidade para detecção de lesões de alto grau. Este é um trabalho de revisão bibliográfica com o objetivo de discutir como métodos biomoleculares podem ser ferramentas importantes para o diagnóstico precoce do câncer de colo de útero. Os métodos mais utilizados para diagnosticar o HPV são os exames citopatológicos, colposcópicos e histopatológicos, porém esses métodos podem apresentar altas variações na detecção de lesões neoplásicas. Com este estudo, concluímos a importância do uso da coloração dupla p16/Ki-67 para um diagnóstico preciso em casos de CCU.

Analysis of permeability and biological properties of dentin treated with experimental bioactive glasses / Análise da permeabilidade e propriedades biológicas da dentina tratada com vidros bioativos experimentais

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade obliteradora de diferentes agentes dessensibilizantes em dentina humana através da mensuração da permeabilidade dentinária, e suas performances biológicas através da análise de citotoxicidade em fibroblastos gengivais humanos. Cinquenta molares humanos foram utilizados, dos quais foram obtidos blocos de dentina (4x4x1mm) posteriormente distribuídos em grupos de acordo com o dessensibilizante a ser utilizado (n=10): Grupo 1 - Controle (Saliva artificial. Sem aplicação de agente dessensibilizante); Grupo 2 - Ultra EZ (Ultradent); Grupo 3 - Desensibilize Nano P (FGM); Grupo 4 - Vidro Bioativo T5-OH (solução experimental); Grupo 5 - Vidro Bioativo F18 (solução experimental). Os tratamentos dessensibilizantes foram realizados durante 15 dias. Além disso, os espécimes foram submetidos ao desafio com ácido cítrico para simular condições desmineralizantes do ambiente oral. As amostras foram submetidas à análise de permeabilidade antes e após os procedimentos dessensibilizantes e o desafio ácido. Análise de citotoxicidade foi realizada pelo ensaio Alamar Blue complementado pela quantificação de proteína pelo Método BCA (ácido bicinconínico) (N=3; n=3) nos tempos de avaliação de 15 minutos, 24 horas e 48 horas. Microscopia eletrônica de varredura (MEV) e Espectroscopia de Raio-X por Energia Dispersiva (EDS) foram realizadas para análise qualitativa da dentina tratada. Dados de permeabilidade dentinária foram analisados por ANOVA dois fatores medidas repetidas e Teste de Tukey (α=0,05). Para a citotoxicidade, foram utilizados os testes Kruskal-Wallis e Newman-Keuls (α=0,05). Os resultados mostraram que para a permeabilidade dentinária não houve diferença significante entre os agentes dessensibilizantes após os tratamentos (p> 0,05), porém o grupo controle apresentou os maiores valores (0,131 ± 0,076 Lp, p< 0,05). Após o desafio ácido, o grupo controle manteve os maiores valores (0,044 ± 0,014 Lp) com diferença significante para os demais grupos (p< 0,05), exceto para o Desensibilize Nano P (0,037 ± 0,019 Lp). Quanto à citotoxicidade, não houve diferença entre os grupos experimentais (p> 0,05). Assim, foi possível concluir que o uso de dessensibilizantes à base de biovidros causou efeito similar ao uso de produtos disponíveis comercialmente, em relação à permeabilidade e propriedades biológicas da dentina(AU)

The aim of this study was to evaluate the obliterating capability of different desensitizing agents on human dentin by measuring dentin permeability, and their biological performance by the analysis of cytotoxicity in human gingival fibroblasts. Fifty human molars were used, from which dentin blocks were obtained (4x4x1mm) and distributed in groups according to the desensitizing agent used (n=10): Group 1 - Control (Artificial saliva. No desensitizing agent applied); Group 2 ­ Ultra EZ (Ultradent); Group 3 ­ Desensibilize Nano P (FGM); Group 4 - T5-OH Bioactive Glass (Experimental solution); Group 5 - F18 Bioactive Glass (Experimental solution). The desensitizing treatments were performed for 15 days. In addition, the specimens were subjected to challenge with citric acid to simulate oral environment demineralizing conditions. Samples were subjected to permeability analysis before and after the desensitizing procedures and the acid challenge. Cytotoxicity analysis was performed by using Alamar Blue assay and complemented by total protein quantification by Pierce Bicinchoninic Acid (BCA) assay (N=3; n=3) at 15 minutes, 24-hour and 48-hour time points. Scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersion X-ray spectroscopy (EDS) were performed for qualitative analysis of treated dentin. Data of dentin permeability was analyzed by twoway repeated measures ANOVA and Tukey's post-hoc test (α=0.05). For cytotoxicity, Kruskal-Wallis and Newman-Keuls tests were used (α=0.05). The results showed that for dentin permeability there was no significant difference among the desensitizing agents after treatment (p> 0.05), but the control group presented the highest values (0.131 ± 0.076 Lp, p< 0.05). And after acid challenge, the control group maintained the highest values (0.044 ± 0.014 Lp) with significant difference to the other groups (p< 0.05), except for Desensibilize Nano P (0.037 ± 0.019 Lp). For cytotoxicity, there were no significant differences among the experimental groups (p> 0.05). It was concluded that the use of bioglass-based desensitizers caused similar effects to commercially available products, regarding permeability and dentin biological properties(AU)

Prueba diagnóstica entre la citología, biopsia por congelación e histopatología en el diagnóstico del Nódulo Tiroideo en pacientes atendidos en Solca desde el año 2009 ­2017 / Diagnostic Test between cytology, frozen biopsy and histopathology in the diagnosisof the thyroid nodule in patients treated at Solca from 2009 -2017

Introducción: La citología de nódulos tiroideos es una técnica que, evita procedimientos quirúrgicos innecesarios por lo que se lo ha determinado como primera línea dentro del algoritmo de diagnóstico, el objetivo del estudio fue determinar la sensibilidad y la especificidad de la citología y biopsia por congelación frente al estudio histopatológico en el diagnóstico de nódulos tiroideos en pacientes atendidos en Solca desde el año 2009 -2017. Métodos: Es un estudio de tipo observacional, retrospectivo y de correlación diagnóstica; los datos fueron obtenidos de las historias clínicas de pacientes intervenidos quirúrgicamente por nódulos tiroideos con biopsia por congelación, a quienes se les realizó previamente un estudio citológico en el Departamento de patología de SOLCA de la ciudad de Cuenca, Ecuador. El cálculo del tamaño de la muestra fue de 324 casos. Resultados:324 casos fueron incluidos. El 8.3% correspondió a hombres y el 91.7% a mujeres. La media de la edad fue 51.8 años; la gran mayoría provenían de la provincia Azuay con el 64.8%. En los estudios citológicos el 34.6% (112 casos)corresponden a lesiones inflamatorias benignas; el 11.1% [36 casos]a patologías malignas y 14.2% (46 casos)fueron insatisfactorios. En la biopsia por congelación el mayor porcentaje estuvo concentrado en enfermedades benignas con un 62.6% y 35.5% a lesiones malignas. Hubo 6 casos con el 1.9% en donde fue diferido el criterio diagnóstico. En el histopatológico definitivo el 60.2% (195 casos)fueron patologías benignas y el 39.8% (129 casos)fueron lesiones malignas. La sensibilidad de la PAAF frente a histopatológico es alta con un 91.79%, pero la especificidad es baja con un 51.94%. La sensibilidad y la especificidad de la biopsia por congelación frente a histopatológico es alta con un 98.97% y 90.70% respectivamente lo que le confiere una metodología óptima. Conclusiones: La PAAF de tiroides demuestra ser una metodología útil en el diagnóstico de nódulos, siempre y cuando sea realizada y observada por personal capacitado. La biopsia por congelación constituye una técnica con alta sensibilidad y especificidad que nos permite discriminar lesiones benignas de las malignas. Palabras claves: Nódulo tiroideo, Biopsia con Aguja, Servicio de Patología en Hospital, Oncología Médica, Agencias Voluntarias de Salud, Biología Celular, Biopsia con Aguja Fina

Introduction:Cytology of thyroid nodules is a technique that avoids unnecessary surgical procedures and has therefore been determined as the first line within the diagnostic algorithm.General Objective:To determine the sensitivity and specificity of cytology and freezing biopsy versus histopathological study in the diagnosis of thyroid nodules in patients treated in Solca since 2009 -2017. Methods:This is an observational, retrospective and diagnostic correlation study; the data were obtained from the clinical histories of patients surgically treated by thyroid nodules with freeze biopsy, who underwent a cytological study in the Department of pathology of the city of Cuenca, Ecuador. The calculation of the sample size was 324 cases. Results:8.3% corresponded to men and 91.7% to women. The mean age was 51.8 years; The vast majority came from the province of Azuay with 64.8%. In cytological studies, 34.6% [112 cases]correspond to benign inflammatory lesions; 11.1% [36 cases]to malignant pathologies and 14.2% [46 cases]were unsatisfactory. In the freeze biopsy the greater percentage was concentrated in benign diseases with 62.6% and 35.5% to malignant lesions. There were 6 cases with 1.9% where the diagnostic criterion was deferred. In the definitive histopathological, 60.2% [195 cases]were benign pathologies and 39.8% [129 cases]were malignant lesions. The sensitivity of FNAB to histopathological is high with 91.79%, but the specificity is low with 51.94%. The sensitivity and specificity of freezing versus histopathological biopsy is high with 98.97% and 90.70% respectively, which gives it an optimal methodology. Conclusions: Thyroid PAAF proves to be a useful methodology in the diagnosis of nodules, as long as it is performed and observed by trained personnel. Freezing biopsy is a technique with high sensitivity and specificity that allows us to discriminate benign from malignant lesions. Key words:Thyroid Nodule; Biopsy, Needle;Pathology Department, Hospital; Medical Oncology; Voluntary Health Agencies; Cell Biology; Biopsy, Fine-Needle

Los métodos de estudio anatomopatológicos desde una mirada histórica, social y contextualizada / Pathological study methods from a historical, social and contextualized perspective

RESUMEN El surgimiento y desarrollo de los métodos de estudio anatomopatológicos guarda una estrecha relación con el desarrollo científico- técnico alcanzado por la sociedad. Los métodos tradicionales empleados para el estudio anatomopatológico de las enfermedades se han enriquecido con las nuevas tecnologías, lo que ha favorecido su conocimiento más profundo, en particular el de las neoplasias, una de las primeras causas de muerte en Cuba y en el mundo. En el presente trabajo se hace una panorámica sobre el desarrollo histórico de estos diferentes métodos y su impacto en los procesos de asistencia y educación médica. Se hace una reflexión sobre la necesidad de fortalecer la formación para el uso adecuado del método clínico y para la indicación justificada e interpretación acertada de los resultados de los exámenes que, de manera tradicional, han hecho posible el diagnóstico y la valoración del pronóstico y la terapéutica, evitando de esta manera el uso irracional de otras tecnologías que encarecen la asistencia médica.

ABSTRACT The emergence and development of pathological study methods is closely related to the scientific-technical development achieved by society. The traditional methods used for the pathological study of diseases have been enriched with new technologies, which has favored their deepest knowledge, particularly that of neoplasms, one of the leading causes of death in Cuba and in the world. In this paper, an overview is made of the historical development of the different anatomopathological study methods and their impact on the processes of medical assistance and education. A reflection is made on the need to strengthen training for the proper use of the clinical method and for the justified indication and correct interpretation of the results of the examinations that, in a traditional way, have made possible the diagnosis and the assessment of the prognosis and the therapeutic, thus avoiding the irrational use of other technologies that make medical care more expensive.

Bacterial vaginosis: prevalence, risk profile and association with sexually transmitted infections / Vaginose bacteriana: prevalência, perfil de risco e associação com infecções sexualmente transmissíveis / Vaginosis bacteriana: prevalencia, perfil de riesgo y asociación con infecciones de transmisión sexual

Background and Objectives: Bacterial vaginosis (BV) is the most common cause of vaginal discharge in the world. The study aimed to estimate the prevalence and to identify risk factors associated with bacterial vaginosis. Methods: A cross-sectional study was conducted in Ouro Preto, Brazil, between February and December 2017. Three hundred and forty-one women aged 18 years or older, users of the Brazilian Unified Health System, participated in this study. Women who used oral or topical antibiotics in the four weeks prior to the sample collection and women who had undergone a total hysterectomy were excluded from the study. After signing the Informed Consent Form and filling out a questionnaire containing sociodemographic, behavioral and sexual data, the participants were directed to the collection room, where the nurse collected the samples for the preventive examination of the cervix and also two vaginal swabs. Vaginal swabs and cervical samples were analyzed for cytological abnormalities and BV using Gram staining and cytology. Pathogens causing sexually transmitted infections (STIs) were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). For the analysis of the data, statistical package STATA version 10.0 was used. This study was approved by the Research Ethics Committee of the Federal University of Ouro Preto (UFOP). Results: During the study, 341 women were evaluated. The prevalence of BV using Gram staining (32.5% [CI95% 27.7-37.7%]) and cytology (27.7% [CI95% 23.032.8%]) was similar, however, the sensitivity of cytology was lower (77.8%). Risk factors associated with BV were smoking (IRR 1.5 [CI95%: 1.1  2.1]), use of an intrauterine device (IRR 2.8 [CI95%: 1.2 - 6.5]), and past medical history of BV (IRR 1.5 [CI95%: 1.1 - 2.1]). Correlation between the presence of BV and Trichomonas vaginalis (TV) infection (r=0.24) was observed. Conclusion: The prevalence of BV was affected by life habits and was prevalent in women with TV. Thus, behavioral and social prevention approaches to women with diverse risk profiles may help mitigate TV/BV prevalence and recurrence of BV.(AU)

Contexte et objectifs: La vaginose bactérienne (VB) est la cause la plus fréquente de pertes vaginales dans le monde. Le but de cette étude était d'évaluer la prévalence et les facteurs associés à la vaginose bactérienne. Méthodes: Il s'agit d'une approche descriptive, transversale et quantitative réalisée à Ouro Preto, Minas Gerais, Brésil, entre février et décembre 2017. 341 femmes ont participé à cette étude, âgées de 18 ans ou plus, utilisatrices du Système de santé unifié. Les femmes ayant utilisé des antibiotiques oraux ou topiques dans les quatre semaines précédant le prélèvement et les femmes ayant subi une hystérectomie totale ont été exclues de l'étude. Après avoir signé le formulaire de consentement éclairé et rempli un questionnaire contenant des données sociodémographiques, comportementales et sexuelles, les participants ont été dirigés vers la salle de collecte, où l'infirmière a prélevé les échantillons pour l'examen préventif du col de l'utérus. et aussi deux écouvillons vaginaux. Les échantillons de frottis vaginaux et cervicaux ont été analysés pour les anomalies cytologiques et VB en utilisant la coloration de Gram et la cytologie. Les agents pathogènes causant des infections sexuellement transmissibles (IST) ont été identifiés par réaction en chaîne par polymérase. Pour l'analyse des données, le progiciel statistique STATA version 10.0 a été utilisé. Cette étude a été approuvée par le Comité d'éthique de la recherche de l'Université fédérale d'Ouro Preto (UFOP). Résultats: Au cours de l'étude, 341 femmes ont été évaluées. La prévalence de la VB avec coloration de Gram (32,5% [IC 95% 27,7 - 37,7%]) et de la cytologie (27,7% [IC 95% 23,0 - 32,8%]) était similaire, cependant la sensibilité cytologique était plus faible (77,8%). Les facteurs de risque associés à la VB étaient le tabagisme (IRR 1,5 [IC 95%: 1,1 - 2,1]), l'utilisation d'un dispositif intra-utérin (IRR 2,8 [IC 95%: 1,2 - 6,5] ) et antécédents médicaux de VB (IRR 1,5 [IC 95%: 1,1 - 2,1]). Il y avait une corrélation entre la présence d'une infection à VB et Trichomonas vaginalis (TV) (r = 0,24). Conclusion: La prévalence de la VB était affectée par le mode de vie et l'infection TV. Ainsi, les approches de prévention comportementale et sociale pour les femmes présentant des profils de risque différents peuvent aider à atténuer la prévalence de la TV / VB et la récurrence de la VB.(AU)

Justificativa e Objetivos: A vaginose bacteriana (VB) é a causa mais comum de corrimento vaginal no mundo. O objetivo desse estudo foi avaliar a prevalência e os fatores associados à vaginose bacteriana. Métodos: Trata-se de um descritivo, de forma transversal e abordagem quantitativa realizado em Ouro Preto, Minas Gerais, Brasil, entre fevereiro a dezembro de 2017. Participaram desse estudo 341 mulheres com idade igual ou superior a 18 anos, usuárias do Sistema Único de Saúde (SUS). Mulheres que usaram antibióticos orais ou tópicos nas quatro semanas anteriores à coleta e mulheres que haviam sido submetidas a uma histerectomia total foram excluídas do estudo. Após a assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido e preenchimento de questionário contendo dados sócio-demográfico, comportamental e sexual, as participantes foram encaminhadas para a sala de coleta, onde a enfermeira realizou a coleta das amostras para o exame preventivo do colo do útero e também de dois swabs vaginais. As amostras de esfregaço vaginal e cervical foram analisadas quanto às anormalidades citológicas e VB usando coloração de Gram e citologia. Patógenos causadores de infecções sexualmente transmissíveis (ISTs) foram identificados por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Para a análise dos dados foi utilizado o pacote estatístico STATA versão 10.0. O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP). Resultados: Durante o estudo, 341 mulheres foram avaliadas. A prevalência de VB com coloração de Gram (32,5% [IC95% 27,7 - 37,7%]) e citologia (27,7% [IC95% 23,0 - 32,8%]) foi semelhante, porém a sensibilidade da citologia foi menor (77,8%). Os fatores de risco associados ao VB foram tabagismo (IRR 1,5 [IC95%: 1,1 - 2,1]), uso de dispositivo intrauterino (IRR 2,8 [IC 95%: 1,2 - 6,5]) e história médica pregressa de VB (IRR 1,5 [IC95%: 1,1 - 2.1]). Observou-se correlação entre a presença de infecção por VB e Trichomonas vaginalis (TV) (r = 0,24). Conclusão: A prevalência de VB foi afetada por hábitos de vida e infecção por TV. Assim, abordagens de prevenção comportamental e social para mulheres com diversos perfis de risco podem ajudar a mitigar a prevalência de TV / VB e recorrência de VB.(AU)

Commentary on mitochondrial stereology in transmission electron microscopy / Comentario sobre estereología mitocondrial en microscopía electrónica de transmisión

Mitochondria (m) are responsible for the energy availability of cells, and their analysis is indicated for example, in studies related to metabolism and oxidative stress. The direct measurement of mitochondria (morphometry) is biased because of the section obliquity and position relative to the mitochondria length (non-equatorial cut). Therefore, stereology is an appropriate technique to evaluate mitochondria. However, before beginning the study, it is necessary to consider the premises to obtain random and uniform samples to be analyzed stereology. Mitochondria must have the chance to appear in all the possibilities of cut and orientation in the micrographs. The number of micrographs to be analyzed will depend on the distribution and occupation of mitochondria in the cell. After this is resolved, a proposal is the estimation of the following stereological data: volume density (Vv), surface density (Sv), and mean cross-sectional area (A). Overlapping a known test area at each micrograph, the density by area of mitochondria is estimated (NAT). Vv [m] can easily be estimated by point-counting (Vv = Pp/PT; Pp are the points hitting the structure, PT are the number of points of the test system). Sv is estimated overlaying a test-line (LT) on the micrographs and counting the intersections of the lines (I) with the outer membrane (om), inner membrane (im), and crests (c), thus, Sv [om], Sv [im], Sv [c] (Sv = 2I / LT). A [m] is obtained as the ratio: A = Vv / 2NAT.

Las mitocondrias (m) son responsables de la disponibilidad de energía de las células, y su análisis está indicado, por ejemplo, en estudios relacionados con el metabolismo y el estrés oxidativo. La medición directa de las mitocondrias (morfometría) está sesgada debido a la oblicuidad de la sección y la posición relativa a la longitud de las mitocondrias (corte no ecuatorial). Por lo tanto, la estereología es una técnica apropiada para evaluar las mitocondrias. Sin embargo, antes de comenzar el estudio, es necesario considerar las premisas para obtener muestras aleatorias y uniformes para analizar estereológicamente. Es esencial que las mitocondrias tengan la posibilidad de aparecer en todas las posibilidades de corte y orientación en las micrografías. El número de micrografías que se analizarán dependerá de la distribución y ocupación de las mitocondrias en la célula. Una vez resuelto esto, una propuesta es la estimación de los siguientes datos estereológicos: densidad de volumen (Vv), densidad de superficie (Sv) y área de sección transversal media (A). Superponiendo un área de prueba conocida en cada micrografía, se estima la densidad por área de mitocondrias (NAT). Vv [m] se puede estimar fácilmente contando puntos (Vv = Pp / PT; Pp son los puntos que llegan a la estructura, PT son el número de puntos del sistema de prueba). Sv se estima superponiendo una línea de prueba (LT) en las micrografías y contando las intersecciones de las líneas (I) con la membrana externa (om), la membrana interna (im) y las crestas (c), por lo tanto, Sv [om], Sv [im], Sv [c] (Sv = 2I / LT). A [m] se obtiene como la relación: A = Vv / 2NAT.

Estratégias Utilizadas para Melhorar a Qualidade dos Exames Citopatológicos / Strategies Used to Improve the Quality of Citopathological Examinations / Estrategias Utilizadas para Mejorar la Calidad de los Examenes Citopatológicos

Introdução: O exame citopatológico é utilizado para detecção precoce das lesões precursoras do câncer do colo uterino. Objetivo: Avaliar os indicadores de qualidade de acordo com o Manual de Gestão da Qualidade para Laboratório de Citopatologia. Método: Verificaram-se os laudos das fichas de requisição dos exames citopatológicos do laboratório clínico da Pontifícia Universidade de Goiás (LC-PUC-Goiás) entre janeiro de 2013 e dezembro de 2017. Resultados: Do total de 6.809 diagnósticos, observaram-se 99,4% (6.768/6.809) satisfatórios, sendo 91,3% (6.215/6.809) resultados negativos, 8,1% (553/6.809) diagnósticos com anormalidades citológicas e 0,6% (41/6.809) de exames insatisfatórios. O índice de positividade dos anos de 2013 a 2017 foram 10,5%, 7,9%, 8,6%, 6,8% e 5,3%, respectivamente. O percentual de exames compatíveis com lesão intraepitelial de alto grau (HSIL) entre os exames satisfatórios no ano de 2013 foi de 1,3%; 2014: 1,0%; 2015: 0,5%; 2016: 0,6%; e 2017: 0,7%, resultados dentro do estabelecido, ≥0,4%. A relação de células escamosas atípicas (ASC)/satisfatórios demostrou valores acima do estabelecido nos anos de 2013 com 6,8% e 2015 com 6,1%. Segundo o Manual de Gestão para Controle de Qualidade, espera-se que, no máximo, 4% a 5% de todos dos exames sejam classificados como ASC. Valores acima de 5% necessitam de uma atenção diferenciada. Conclusão: É de suma importância a educação continuada dos profissionais que participam de todas as etapas do processo, da fase pré-analítica à analítica, para que possíveis erros possam ser corrigidos e medidas preventivas tomadas para uma melhor qualidade na interpretação dos exames citopatológicos.

Introduction: The cytopathological examination is used for early detection of cervical cancer precursor lesions. Objective: Evaluate the quality indicators according to the Quality Management Manual for the Cytopathology Laboratory. Method: The results of the request forms of cytopathological examinations of the Clinical Laboratory of the Pontifical University of Goiás (LC-PUC-Goiás) were verified between January 2013 and December 2017. Results: Of 6,809 diagnoses in total, 99.4% (6,768/6,809) were satisfactory, 91.3% (6,215/6,809) were negative, 8.1% (553/6,809) presented cytological abnormalities and 0.6% (41/6,809) were unsatisfactory. The Positivity Index from 2013 to 2017 was 10.5%, 7.9%, 8.6%, 6.8% and 5.3%, respectively. The percentage of examinations with high-grade intraepithelial lesion (HSIL) among satisfactory examinations in 2013 was 1.3%, in 2014, 1.0%, in 2015, 0.5%, in 2016, 0.6 % and in 2017, 0.7%, results within the established ≥ 0.4%. The atypical squamous cells (ASC)/satisfactory ratio showed values above the standard figures in 2013 with 6.8% and 2015 with 6.1%. According to the Quality Control Management Manual, it is expected that, at the most, 4% to 5% of all exams be classified as ASC. Values above 5% demand differentiated attention. Conclusion: It is of the utmost importance the continued education of professionals who participate in all stages of the process, from the pre-analytical to the analytical phase, so that possible errors can be avoided and preventive measures taken for better quality interpretation of the cytopathological examinations.

Introducción: El examen citopatológico se utiliza para la detección temprana de lesiones precursoras de cáncer cervical. Objetivo: Evaluar los indicadores de calidad de acuerdo con el Manual de Gestión de Calidad para el laboratorio de citopatología. Método: Se verificaron los informes de los formularios de solicitud para los exámenes citopatológicos del Laboratorio Clínico de la Pontificia Universidad de Goiás (LC-PUC-Goiás), de enero de 2013 a diciembre de 2017. Resultados: Del total de 6.809 diagnósticos, se observarán 99,4% (6.768/6.809) diagnósticos satisfactorios, 91,3% (6.215/6.809) resultados negativos, 8,1% (553/6.809) diagnósticos con anomalías citológicas y 0,6% (41/6.809) exámenes insatisfactorios. El índice de positividad de 2013 a 2017 fue de 10,5%, 7,9%, 8,6%, 6,8% y 5,3% respectivamente. El porcentaje de exámenes compatibles con lesiones intraepiteliales de alto grado (HSIL) entre los exámenes satisfactorios en 2013 fue de 1,3%; 2014: 1,0%; 2015: 0,5%; 2016: 0,6%; y 2017: 0,7%, resultados dentro de lo establecido, ≥0,4%. La relación células escamosas atípicas (ASC)/satisfactorio fue más alta que la establecida en 2013 con 6,8% y 2015 con 6,1%. Según el Manual de Gestión de Control de Calidad, se espera que un máximo del 4% al 5% de todos los exámenes se clasifiquen como ASC. Los valores superiores al 5% requieren una atención diferente. Conclusión: Es de suma importancia la educación continua de los profesionales que participan en todas las etapas del proceso, desde la fase preanalítica hasta la analítica, para que se puedan corregir los posibles errores y se tomen medidas preventivas para una mejor calidad en la interpretación de los exámenes citopatológicos.

Collection and culture of human connective tissue cells from gingival explant technique for oral tissue bioengineering / Colección de células de tejido conectivo humano a partir de la técnica de explante gingival para bioingeniería de tejidos orales

SUMMARY: Cell culture is an important tool in medical, odontological and biological research laboratories, supporting cell therapies and tissue bioengineering strategies. Gingival fibroblasts present structural function, being able to modulate their metabolic capacity, which is reflected in the tissue morphology. The possibility of culturing fibroblasts in vitro, in monolayer or on three-dimensional scaffolds, for subsequent transplants in vivo opens important perspectives for the periodontal surgical clinic. The objective of the present article is to present a method of obtaining and cultivating viable human gingival fibroblasts for in vitro research. Explants derived from periodontal surgical discards were used, grown in 25 cm2 bottles to obtain a primary cell culture. After observing the proliferation and growth of the fibroblasts that interconnected and formed a monolayer network, involving the periphery of the explants, it was possible to remove the explants, to make the passage and the new subcultures were obtained in a ratio of 1:1. After 7 days, the amount of viable cells was analyzed in triplicate, using the Neubauer chamber technique, in cell culture bottles of 25 mm2 (T25) and 75 mm2 (T75). Fibroblasts were described and subclassified morphologically. The results showed a growth pattern in both bottles, but with a larger number in bottles of 75 cm2. Cells with fibroblastic morphology were subclassified into reticular and fusiform, being predominant those with fusiform morphology. In conclusion, culture of explant of human gingival connective tissue is a viable method for obtaining gingival connective tissue cells suitable for laboratory tests in cell culture, aiming at obtaining constructs for gingival tissue engineering.

RESUMEN: El cultivo celular es una herramienta importante en los laboratorios de investigación médica, odontológica y biológica, que apoyan las terapias celulares y las estrategias de bioingeniería de tejidos. Los fibroblastos gingivales presentan una función estructural, pudiendo modular su capacidad metabólica, que se refleja en la morfología tisular. La posibilidad de cultivar fibroblastos in vitro, en monocapa o en andamios tridimensionales, para trasplantes posteriores in vivo abre perspectivas importantes para la clínica de cirugía periodontal. El objetivo del presente artículo es presentar un método para obtener y cultivar fibroblastos gingivales humanos viables para investigación in vitro. Se utilizaron explantes derivados de los descartes quirúrgicos periodontales, crecidos en frascos de 25 cm2 para obtener un cultivo de células primarias. Después de observar la proliferación y el crecimiento de los fibroblastos que se interconectaron y formaron una red de monocapa, que involucraba la periferia de los explantes, fue posible eliminar los explantes, hacer el pasaje y los nuevos subcultivos se obtuvieron en una proporción de 1:1. Después de 7 días, la cantidad de células viables se analizó por triplicado, utilizando la técnica de cámara de Neubauer, en botellas de cultivo celular de 25 mm2 (T25) y 75 mm2 (T75). Los fibroblastos fueron descritos y sub-clasificados morfológicamente. Los resultados mostraron un patrón de crecimiento en ambas botellas, pero con un número mayor en botellas de 75 cm2. Las células con morfología fibroblástica se subclasificaron en reticulares y fusiformes, predominando aquellas con morfología fusiforme. En conclusión, el cultivo de explante de tejido conectivo gingival humano es un método viable para obtener células de tejido conectivo gingival adecuadas para pruebas de laboratorio en cultivos celulares, con el objetivo de obtener construcciones para la ingeniería del tejido gingival.

Pancreatic islet stereology: estimation of beta cells mass / Estereología de los islotes pancreáticos: estimación de la masa de células beta

Obesity and its comorbidities are becoming epidemic in the Western world. Beta cell mass estimation is an important indicator to track the progression of insulin resistance/type 2 diabetes, particularly in experimental studies, where it can be performed with stereological tools in an unbiased way. In this work, we present a simple protocol that can contribute to doing the practice of estimating the mass of beta cells more frequent and reproducible. As with any quantitative study, the necessary precautions regarding sampling and randomness must be respected.

La obesidad y sus comorbilidades se están convirtiendo en una epidemia en el mundo occidental. La estimación de la masa de células beta es un indicador importante para rastrear la progresión de la resistencia a la insulina/diabetes tipo 2, particularmente en estudios experimentales, donde se puede realizar con herramientas estereológicas de manera imparcial. En este trabajo presentamos un protocolo simple que puede contribuir a que la práctica de estimar la masa de células beta sea más frecuente y reproducible. Como en cualquier estudio cuantitativo, deben respetarse las precauciones necesarias con respecto al muestreo y la aleatoriedad.

FIPLIQ: an alternative solution for gynecological and oral cytology / FIPLIQ: uma solução alternativa para exames citológicos ginecológicos e bucais

ABSTRACT Introduction: Liquid-based solution for cytology has been developed to improve Pap test. Some liquid media are commercially available, however, due to the high cost there are difficulties in implementing it in the public health programs of many countries. Objectives: To study the suitability of alternative liquid media for the collection and preservation of samples for cytologic examinations, comparing the results with the conventional Papanicolaou methodology. Material and methods: In this study, 127 different compositions of alternative liquid-based solutions were tested with samples from 10 volunteers for oral cytology and 20 samples from volunteers for cervical cytology. Formaldehyde-isopropanol-phosphate (FIPLIQ) was used to preserve cervical samples prepared and analyzed on the same day and 3, 7, and 15 days after collection, compared with Pap smear. Evaluations on quality and adequacy of cell types, microorganisms or their cytopathic effects, reactive, degenerative and dysplastic cell alterations were performed. Results: Samples processed with FIPLIQ showed results similar to those of conventional Pap smear when analyzing staining cytoplasm with indistinct cytoplasm borders, chromatin structure, presence or absence of different types of cell and microorganisms, reparative process, preneoplastic, and neoplastic cell changes; the samples were stored for up to 15 days after collection. Conclusion: Preliminary results suggest that FIPLIQ is suitable for the preparation and preservation of cytology specimens for up to 15 days.

RESUMEN Introducción: La citología en medio líquido fue desarrollada para mejorar la prueba de Papanicolaou. Algunos medios líquidos son comercialmente disponibles; no obstante, debido al costo elevado, hay dificultades para su implementación en programas de salud pública en muchos países. Objetivos: Estudiar la adecuación de medios líquidos alternativos para recolecta y la preservación de muestras para exámenes citológicos, comparando los resultados con la metodología convencional de Papanicolaou. Material y métodos: En este estudio, 127 diferentes composiciones de soluciones alternativas de medios líquidos fueron testadas con muestras de 10 voluntarios para citología oral y 20 muestras de voluntarias para citología cervical. El fosfato de formaldehído- isopropanol (FIPLIQ) fue usado para preservación de muestras cervicales preparadas y analizadas en el mismo día, y tres, siete y 15 días después de la recolecta, en comparación con la citología convencional. Se hicieron evaluaciones de calidad y adecuación de los tipos celulares, microorganismos o sus efectos citopáticos, cambios celulares reactivos, degenerativos y displásicos. Resultados: Las muestras procesadas con FIPLIQ presentaron resultados similares a los de la prueba convencional de Papanicolaou cuando analizados color y bordes citoplasmáticos mal definidos, estructura de cromatina, presencia o ausencia de diferentes tipos de células y microorganismos, proceso reparativo, pre-neoplásico y alteraciones celulares neoplásicas; las muestras se conservaron hasta 15 días después de la recolección. Conclusión: Los resultados preliminares sugieren que el FIPLIQ es adecuado para preparación y preservación de especímenes citológicos hasta 15 días.

RESUMO Introdução: A citologia em meio líquido foi desenvolvida para melhorar o teste de Papanicolaou. Alguns meios líquidos são comercialmente disponíveis, no entanto, devido ao alto custo, há dificuldades para sua implementação em programas de saúde pública em muitos países. Objetivos: Estudar a adequabilidade de meios líquidos alternativos para a coleta e a preservação de amostras para exames citológicos, comparando os resultados com a metodologia convencional de Papanicolaou. Material e métodos: Neste estudo, 127 diferentes composições de soluções alternativas de meios líquidos foram testadas com amostras de 10 voluntários para citologia oral e 20 amostras de voluntárias para citologia cervical. O fosfato de formaldeído-isopropanol (FIPLIQ) foi utilizado para preservar amostras cervicais preparadas e analisadas no mesmo dia e três, sete e 15 dias após coleta, em comparação com a citologia convencional. Avaliações de qualidade e adequação dos tipos celulares, de microrganismos ou seus efeitos citopáticos, de alterações celulares reativas, degenerativas e displásicas foram realizadas. Resultados: As amostras processadas com FIPLIQ apresentaram resultados semelhantes aos do teste convencional de Papanicolaou quando analisados coloração e apagamento de bordas citoplasmáticas, estrutura de cromatina, presença ou ausência de diferentes tipos de células e microrganismos, processo reparativo, pré-neoplásico e alterações celulares neoplásicas; as amostras foram conservadas por até 15 dias após a coleta. TOPICO Conclusão: Os resultados preliminares sugerem que o FIPLIQ é adequado para a preparação e a preservação de espécimes citológicos por até 15 dias.

Comparative evaluation of the quality of Papanicolaou staining at different intervals of fixation times using 96% ethyl alcohol / Avaliação comparativa da qualidade da coloração de Papanicolaou em diferentes tempos de fixação em álcool etílico a 96%

ABSTRACT Introduction: Fixation of cytological smears consists of immediate immersion in appropriate fixative, in order to preserve cellular morphological characteristics, it is essential for the microscopic examination and diagnostic interpretation. Objective: To evaluate the influence of fixation times on the morphological and staining characteristics of samples fixed in ethanol and stained by the Papanicolaou method. Method: Experimental, quantitative and qualitative research was carried out on 99 samples of the jugal mucosa scrapings from 33 participants, fixed in 96% ethyl alcohol in three different times. Group A: 15 minutes; group B: 30 minutes; group C: seven days. The quality of staining was categorized in Optimal, Good, Regular and Poor, with subsequent recategorization at optimal and non-optimal. To verify the association among the groups and the categories, Fisher's exact test was performed, with significance level of 0.05. Results: From the 99 stained slides, 19 were discarded due to acellularity, remaining 80 slides. From these, 28 in group A, 26 in group B and 26 in group C were evaluated. In Group A, optimal quality was found in 60.7% (n = 17), good in 28.6% (n = 8), regular in 10.7% (n = 3) and poor in 0% (n = 0). In group B optimal was found in 61.5% (n = 16), good in 30.8% (n = 8), regular in 7.7% (n = 2) and poor in 0% (n = 0). In group C, optimal was found in 92.3% (n = 24), good in 7.7% (n = 2), regular in 0% (n = 0) and poor in 0% (n = 0). In the three groups, there was no representation of the Poor category. Conclusion: The results suggest that there is a significant difference in the staining quality (p-value = 0.01) according to the fixation time.

RESUMEN Introducción: La fijación de extensiones citológicas consiste en la inmersión inmediata en fijador adecuado para preservar la morfología celular, siendo esencial para el análisis microscópico y la interpretación diagnóstica. Objetivo: Evaluar la influencia de los tiempos de fijación en las características morfológicasy de tinción de muestras fijadas con metanoly tenidas con el método de Papanicolaou. Método: Se realizó una investigación experimental, cuantitativa y cualitativa de 99 muestras de raspado de la mucosa yugal de 33 participantes, fijadas con etanol al 96% en tres tiempos distintos. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: 7 días. La calidad de la tinción fue categorizada en óptima, buena, regular y mala, con posterior reclasificación en óptima y no óptima. Para determinar la asociación entre los grupos y las categorias, se realizó la prueba exacta de Fisher, con un nivel de significación del 0,05. Resultado: De las 99 muestras tenidas, 19 fueron desechadas por acelularidad, quedando 80 para ser analizadas. De estas muestras, 28 fueron evaluadas en el grupo A, 26 en el grupo B y 26 en el grupo C. En el grupo A, hemos encontrado calidad óptima - 60,7% (n =17); buena - 28,6% (n = 8); regular -10,7% (n = 3) y mala - 0% (n = 0). En el grupo B, óptima - 61,5% (n = 16); buena - 30,8% (n = 8); regular - 7,7% (n = 2); y mala - 0% (n = 0). En el grupo C, óptima - 92,3% (n = 24); buena - 7,7% (n = 2); regular - 0% (n = 0) y mala - 0% (n = 0). En los tres grupos no hubo representación en la categoria mala. Conclusión: Los resultados sugieren que hay diferencia significativa en la calidad de la tinción (p = 0,01) de acuerdo con el tiempo de fijación.

RESUMO Introdução: A fixação dos esfregaços citológicos consiste na imersão imediata em fixador adequado para preservar as características morfológicas celulares, sendo essencial para a análise microscópica e a interpretação diagnóstica. Objetivo: Avaliar a influência dos tempos de fixação nas características morfológicas e tintoriais de amostras fixadas em álcool etílico e coradas pelo método de Papanicolaou. Método: Realizou-se pesquisa experimental, quantitativa e qualitativa de 99 amostras de raspado da mucosa jugal de 33participantes, fixadas em álcool etílico 96% em três tempos diferentes. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: sete dias. A qualidade da coloração foi categorizada em ótima, boa, regular e ruim, com posterior recategorização em ótimo e não ótimo. Para verificar a associação entre os grupos e as categorias, realizou-se teste exato de Fisher, com nível de significância de 0,05. Resultado: Das 99 lâminas coradas, 19 foram desprezadas por acelularidade, restando 80 lâminas para serem analisadas. Destas, foram avaliadas 28 no grupo A, 26 no grupo B e 26 no grupo C. No grupo A, foi encontrada qualidade ótima - 60,7% (n = 17); boa - 28,6% (n = 8); regular - 10,7% (n = 3) e ruim - 0% (n = 0). No grupo B, ótima - 61,5% (n = 16); boa - 30,8% (n = 8); regular - 7,7% (n = 2); e ruim - 0% (n = 0). E no Grupo C, ótima - 92,3% (n = 24); boa - 7,7% (n = 2); regular - 0% (n = 0); e ruim - 0% (n = 0). Nos três grupos não houve representação na categoria ruim. Conclusão: Os resultados sugerem que há diferença significativa na qualidade da coloração (p = 0,01) de acordo com o tempo de fixação.

É o carcinoma colônico localmente avançado não metastático uma variante biológica distinta? Estudo baseado na avaliação histológica, painel imuno-histoquímico e sobrevida / Is the non-metastatic, locally advanced colon adenocarinoma a distinct biological tumor variant? A study based on pathological evaluation, immunohistochemical panel and survival

RESUMO Objetivo: avaliar diferenças clínicas e patológicas entre os adenocarcinomas colônicos localmente avançados com aderências entre órgãos ou estruturas adjacentes (LACA) e adenocarcinomas colônicos com outras apresentações clínicas. Métodos: estudo retrospectivo a partir de amostra de conveniência de pacientes com adenocarcinoma colônico, estádio patológico pT3, distribuídos de acordo com características clínicas e patológicas em três grupos: tumores localmente avançados (LACA), tumores pT3 sem aderências ou metástases à distância (SF), e tumores com doença metastática (M1). Foram avaliadas as características clínicas e patológicas, e a expressão de sete marcadores imuno-histoquímicos relacionados à proliferação/apoptose, invasão celular/migração e metástase. Resultados: foram avaliados 101 pacientes: 30 LACA, 44 SF e 27 M1. Tumores localmente avançados apresentaram dimensões maiores e estiveram associados a aumento das taxas de infiltração linfocitária, menores níveis de expressão de bax e de CD 44v6 quando comparados aos grupos SF e M1. Diferenças significantes foram observadas em relação aos LACA e M1 em relação à localização colônica, histologia, estado linfonodal e expressão bax e CD44v6. Diferenças foram observadas em relação aos três grupos frente ao tamanho do tumor e infiltrado linfocítico. A sobrevida foi similar entre os grupos LACA e SF (p=0,66) e foi inferior no grupo M1 (p<0,001). Conclusão: os dados sugerem que os adenocarcinomas colônicos localmente avançados com aderências entre órgãos ou estruturas adjacentes representam uma entidade distinta.

ABSTRACT Objective: to evaluate the clinical and pathological differences between locally advanced colonic adenocarcinomas (LACA) with adhesions between adjacent organs or structures, and colonic adenocarcinomas with other clinical presentations. Methods: we conducted a retrospective study from a convenience sample of patients with colonic adenocarcinoma, pathological stage pT3, distributed according to clinical and pathological characteristics in three groups: locally advanced tumors (LACA), pT3 tumors without adhesions or distant metastases (SF) and tumors with metastatic disease (M1). We evaluated clinical and pathological characteristics and the expression of seven immunohistochemical markers related to proliferation/apoptosis, cell invasion/migration and metastasis. Results: we studied 101 patients: 30 LACA, 44 SF and 27 M1. Locally advanced tumors presented larger dimensions and were associated with increased lymphocyte infiltration rates, lower levels of bax expression, and CD 44v6 when compared with SF and M1 groups. We observed significant differences between LACA and M1 in relation to colonic location, histology, lymph node status and bax and CD44v6 expression. We found differences were observed between the three groups for tumor size and lymphocytic infiltrate. Survival was similar in the LACA and SF groups (p=0.66) and was lower in the M1 group (p<0.001). Conclusion: the data suggest that locally advanced colonic adenocarcinomas with adhesions between adjacent organs or structures represent a distinct entity.

Experimental validation of a rapid staining method and digital cytology for cervical and anal cancer / Validação experimental de um método de coloração rápida e citologia digital para cancro ginecológico e anal

ABSTRACT Cytology is used as detection and screening method of malignant and pre-malignant lesions showing their potential since the original works of Papanicolaou. The cytological smears are usually stained with the Pap staining, although this method is time consuming and requires different reagents. The aim of this study is to assess the quality of an original Blue staining in exfoliative smears comparing it with the standard Papanicolaou staining. The new Blue staining allows staining gynecological cytology with high quality standards at reduced cost and time when compared to the Papanicolaou method.

RESUMO A citologia é utilizada como método de detecção e rastreio de lesões malignas e pré-malignas e mostra seu potencial desde os trabalhos originais de Papanicolaou. Geralmente, os esfregaços citológicos são corados com a coloração de Papanicolaou, apesar desse método exigir muito tempo e vários reagentes. O objetivo deste estudo é avaliar a qualidade de uma coloração original Blue Stain em esfregaços esfoliativos comparando-a com a coloração standard de Papanicolaou. O novo método de coloração Blue Stain permite corar citologias ginecológicas com elevados padrões de qualidade a um custo e tempo reduzidos quando comparado com o método de Papanicolaou.

La matriz extracelular en la curación de las heridas cutáneas. Aspectos físicos, químicos y biológicos / Extracellular matrix in healing of cutaneous wounds. Physical, chemical and biological aspects

Se revisan los nuevos conocimientos sobre la matriz extracelular (MEC), que han permitido descubrir su importante rol en la cicatrización de las heridas cutáneas. Se describen sus características morfofisiológicas y cómo interviene en la curación de las heridas cutáneas. Se presentan cuatro casos clínicos en los que se aplicó este enfoque terapéutico: los sustitutos de piel y la “cura húmeda”.

We review the new knowledge about the extracellular matrix (ECM) that has allowed us to discover its important role in the healing of cutaneous wounds. The morphophysiological characteristics of ECM and its role in the healing of cutaneous wounds are described. Four clinical cases are presented where this therapeutic approach was applied: the skin substitutes and the “moist wound healing”.

Citología por punción-aspiración con aguja fina guiada por ultrasonido endoscópico en el diagnóstico de adenocarcinoma ductal de páncreas / Fine needle aspiration cytology guided by ultrasound endoscopy in the diagnosis of ductal adenocarcinoma of the pancreas

El cáncer de páncreas es la cuarta causa de muerte por cáncer en los Estados Unidos; en el mundo se asocia con 227.000 muertes anuales, aproximadamente. Es producto de múltiples factores, siendo el tabaquismo el principal factor de riesgo. La punción-aspiración con aguja fina guiada por ultrasonido endoscópico es una técnica muy eficaz en el diagnóstico de lesiones neoplásicas del páncreas. El diagnóstico citológico mediante esta técnica debe hacerse según los lineamientos para el sistema pancreático-biliar de la Papanicolaou Society of Cytopathology. Dichos lineamientos incluyen las indicaciones, las técnicas, la terminología y la nomenclatura, así como los estudios auxiliares, el manejo posterior al procedimiento y los criterios citológicos para el diagnóstico. La especificidad de una interpretación positiva o maligna para la punción-aspiración pancreática con aguja fina, es de 90 a 95 % en la mayoría de los estudios.

Pancreatic cancer is the fourth cause of cancer deaths in the United States. Worldwide this type of cancer is responsible for 227,000 deaths per year. Pancreatic cancer is multifactorial, with smoking being the main risk factor. Endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration is a highly effective technique for the diagnosis of neoplastic lesions of the pancreas. Cytological diagnosis by this technique should be performed under the guidelines of the pancreatic-biliary system of the Papanicolaou Society of Cytopathology. These guidelines address indications, techniques, terminology and nomenclature, ancillary studies and post-procedure management, as well as cytological criteria for diagnosis. The specificity of a positive or malignant interpretation for the pancreatic fine needle aspiration corresponds to 90-95% in most studies.